空氣環(huán)境微生物檢測報(bào)告

　　摘要：

　　空氣是人類賴以生存的必須環(huán)境，也是微生物借以擴(kuò)散的媒介�？諝庵写嬖谥�細(xì)菌、真菌、病毒、放線菌等多種微生物粒子，這些微生物粒子是空氣污染物的重要組成部分。而實(shí)驗(yàn)室中的環(huán)境是更為重要的，對微生物的要求更加的高，一個(gè)好的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境可以讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加的精確。本實(shí)驗(yàn)通過對實(shí)驗(yàn)室空氣的采集，對微生物的培養(yǎng)及染色觀察來證明證明實(shí)驗(yàn)室環(huán)境存在微生物，也證明無菌操作的重要性。

　　正文：

　　前言

　　實(shí)驗(yàn)室空氣微生物含量多少可以反映該實(shí)驗(yàn)室的空氣質(zhì)量，需要測定空氣中的微生物數(shù)量和空氣污染微生物。實(shí)驗(yàn)室的空氣中微生物越少，代表在該實(shí)驗(yàn)室做微生物實(shí)驗(yàn)的時(shí)候誤差會(huì)小，成功率會(huì)高。本實(shí)驗(yàn)以牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中的微生物，利用革蘭氏染色法及顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)室中空氣中的微生物種類及形態(tài)。

　　1.材料方法

　　1.1實(shí)驗(yàn)材料

　　1.1.1樣品來源

　　實(shí)驗(yàn)室空氣

　　1.1.2藥品

　　氫氧化鈉（固體），牛肉膏，蛋白胨，瓊脂粉，Nacl。

　　1.1.3耗材

　　培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基）無菌水，石棉網(wǎng)，電爐，酒精燈，培養(yǎng)皿，三角瓶，500ml燒杯，玻璃棒，超凈工作臺(tái)，Ph試紙。

　　1.2方法

　　1.2.1取樣

　　采集實(shí)驗(yàn)室空氣樣本

　　1.2.2制作培養(yǎng)基

　　在500ml燒杯內(nèi)加水200毫升，放入牛肉膏1.0g、蛋白胨2.0g和氯化鈉1.0g，做記號(hào)，放在火上加熱，待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂4.0g，不斷攪拌以免粘底。停止加熱后冷卻，加入配置的NaOH溶液調(diào)節(jié)PH值至7.2-7.5后倒入三角瓶。

　　1.2.3高壓滅菌

　　將培養(yǎng)皿和三角瓶用報(bào)紙及繩包裝后，利用高壓滅菌鍋將培養(yǎng)皿和裝有培養(yǎng)液的三角瓶高壓滅菌，121度維持20分鐘.

　　1.2.4分裝培養(yǎng)液及加入樣本

　　在超凈工作臺(tái)上將三角瓶中的培養(yǎng)液分裝到6個(gè)培養(yǎng)皿當(dāng)中，等培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液冷卻凝固，將其中三個(gè)加入實(shí)驗(yàn)室中的空氣樣本，二個(gè)加入超凈工作臺(tái)空氣，一個(gè)作為對照組。對照組A，實(shí)驗(yàn)組B貼標(biāo)簽做記號(hào)，倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　1.2.5革蘭氏染色，觀察其種類，形態(tài)

　　將培養(yǎng)好的帶有微生物菌落的培養(yǎng)基拿出，取干凈的載玻片于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，在載玻片中央滴一滴無菌蒸餾水，將接種環(huán)在火焰上燒紅，待冷卻后從斜面挑取少量菌種與玻片上的水滴混勻后，在載玻片上涂布成一均勻的薄層，涂布面不宜過大。利用高溫，手持載玻片的一端，標(biāo)本向上，在酒精燈火焰外層盡快的來回通過2~3次，共約2~3秒鐘，放置待冷后，進(jìn)行染色。初染：用結(jié)晶紫染色1m(轉(zhuǎn)載于:www.hnNscy.CoM:空氣微生物)in后水洗，吸干。媒染：加碘液1min后水洗，吸干。脫色：用脫色液（95%乙醇）脫色30s，水洗，吸干。復(fù)染：用番紅復(fù)染3min，水洗，吸干。待標(biāo)本片干后置顯微鏡下，用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物后用油鏡觀察，注意細(xì)菌細(xì)胞的顏色。

　　2.結(jié)果與分析

　　2.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果

　　2.2分析

　　此次實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康幕�本完成，但仍存在一些誤差。本實(shí)驗(yàn)采取1個(gè)培養(yǎng)基無菌作為對照組，另外5個(gè)作為實(shí)驗(yàn)組，3個(gè)采用實(shí)驗(yàn)室空氣，2個(gè)采用超凈工作臺(tái)空氣（1）5個(gè)實(shí)驗(yàn)組中，有一個(gè)培養(yǎng)皿沒有生長出細(xì)菌，由于倒培養(yǎng)基操作時(shí)培養(yǎng)液傾倒過少，導(dǎo)致無法滿足細(xì)菌生長代謝繁殖的所需能量。（2）如圖四，是培養(yǎng)皿中長出的細(xì)菌，經(jīng)查詢，此細(xì)菌為呼吸道內(nèi)的雜菌，由于操作時(shí)操作者不慎咳嗽將菌注入培養(yǎng)皿中。（3）如圖6使用革蘭氏染色法，但鏡下觀察有重疊現(xiàn)象，制片時(shí)為徹底打散細(xì)菌。

　　3.討論

　　本實(shí)驗(yàn)除了略微操作失誤以外，其他良好，經(jīng)討論，我們認(rèn)為無菌操作時(shí)十分重要的，本實(shí)驗(yàn)操作簡單，步驟清晰，答題沒有改動(dòng)的地方，但在其中一個(gè)操作過程中，把培養(yǎng)皿直接放在教室中和超凈工作臺(tái)上是不可取的，導(dǎo)致上述分析中的

　�。�2）失誤。我們應(yīng)該更加注重?zé)o菌操作。

　　3.參考文獻(xiàn)

　　[1]．《公共場所空氣的微生物檢測報(bào)告》孫艷萍

　　[2].《圖書館內(nèi)外空氣微生物檢測及資源保護(hù)》王伯秋

　　[3].《基礎(chǔ)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》主編：陳永富哈爾濱工程大學(xué)出版社2009